眾所周知，妊娠期間胎兒於羊水中成長。羊膜穿刺最簡明的解釋，即是將針頭刺入羊膜腔抽取少量羊水進行檢測。
羊膜穿刺屬產前診斷技術，通常適用於妊娠中期。羊水存在於羊膜腔內。羊水穿刺的最佳時機為妊娠16至24週，此時胎兒體型較小且羊水量相對充沛，胎兒漂浮於羊水中並形成寬闊的羊水帶。此狀態能有效降低穿刺過程中損傷胎兒的風險。
穿刺前需進行超音波檢查，確認胎兒位置與狀態，避免誤傷胎兒。選定穿刺部位後，進行皮膚消毒、鋪設無菌巾並施予局部麻醉。隨後使用帶針芯的腰椎穿刺針垂直刺入選定部位。針頭穿過腹壁與子宮壁時會產生兩次空感（針尖刺入空氣的觸感）。移除針芯後，以2毫升注射器抽取2毫升羊水。接著以20毫升空針再抽取20毫升羊水。
抽吸完成後拔除針頭，以消毒紗布覆蓋傷口並施壓2至3分鐘。此期間孕婦需平躺靜臥2小時。羊水穿刺術後沐浴時須格外謹慎，避免觸碰患處。